Гуанидин тиоцијанат 593-84-0 олакшава екстракцију нуклеотида и пептида из унутрашњости животиња

Gvanidin tiocijanat | 593-84-0 | je jak denaturant proteina. To je beli kristalni prah, iritantan i osetljiv na svetlost. Rastvorljiv je u etanolu i vodi, sa tačkom topljenja od 118℃. Гуанидин тиоцијанат се углавном користи за денатурацију, liza ćelija i ekstrakcija RNK i DNK. To je uobičajena hemijska komponenta za ekstrakciju nukleinske kiseline.

Патент цн111500664а открива поступак за екстракцију нуклеотида и полипептида из унутрашњости животиња употребом гванидин тиоцијаната. Нуклеотиди су једињења састављена од пуринске базе или пиримидинске базе, рибозе или деоксирибозе и фосфорне киселине, која се широко користе у медицини, производима за мајку и дете, зачинима и адитивима за храну. Полипептид је И ±- Једињења настала од аминокиселина повезаних пептидним везама су међупроизводи хидролизе протеина, који укључују различита поља људских хормона, живаца, раст и репродукцију ћелија. Њихов значај лежи у регулисању физиолошких функција различитих система и ћелија у телу, активирању релевантних ензима у телу, промовисању пропустљивости посредне метаболичке мембране, или контролирању транскрипције ДНК или утицају на синтезу специфичних протеина, на крају производе специфичне физиолошке ефекте.

Животињски органи су богати нуклеотидима и пептидима, али се тренутно екстракција нуклеотида и пептида углавном врши одвојено, што доводи до расипања ресурса и сложених процеса. Гуанидин тиоцијанат је користан за екстракцију нуклеотида и пептида из унутрашњости животиња. Специфичне методе су следеће:

Prvo operite utrobu svežih životinja, ocedite, iseckajte, zatim izgnječite, dodajte dejonizovanu vodu da dobijete izmešani rastvor, zatim u mešani rastvor dodajte rastvor gvanidin tiocijanata, vibrirajte i dobro promešajte, a zatim odložite. Zatim mu se dodaje nosač koji sadrži silicijum dioksid, jer će gvanidin tiocijanat cepati ćelije, a nukleotidi oslobođeni iz ćelija će se kombinovati sa nosačem silicijum dioksida. Izvadite nosač koji sadrži silicijum dioksid, apsorbujte i odvojite ga eluentom da biste dobili prečišćene nukleotide.

Zatim se rastvor NaCl dodaje u zaostali rastvor iz kojeg je izvađen nosač silicijum dioksida, mešani rastvor se ekstrahuje, zatim se dodaje kompozitna proteaza, zatim se vrši mikrotalasna enzimska hidroliza, rastvor enzimske hidrolize se zagreva u vodenom kupatilu. , centrifugiran, supernatant se uzima i polipeptid se dobija nakon sušenja zamrzavanjem.

Ова метода користи карактеристике да гванидин тиоцијанат може уништити ћелијску структуру и денатурирати протеин. Не само да може сукцесивно да екстрахује нуклеотиде и пептиде, већ има и предности једноставне методе и високе ефикасности. Истовремено, избегава се и проблем реакције између биохемијских реагенса при додавању биохемијских реагенаса за екстракцију.